Все
 
 
 


Роль оксида азота во внешнесекреторной деятельности поджелудочной железы кур
 
Код статьиS250026270000672-4-1
DOI10.31857/S250026270000672-4
Тип публикации Статья
Статус публикации Опубликовано
Авторы
Петров В. А. 
Аффилиация:
Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт птицеводства РАН
Российский национальный исследовательский медицинский университет
Адрес: Российская Федерация, Москва
Кочиш И. И.
Аффилиация: Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии им. К.И.Скрябина
Адрес: Российская Федерация, Москва
Фисинин В. И.
Аффилиация: Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт птицеводства РАН
Адрес: Российская Федерация
Ушаков А. С.
Аффилиация: Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт птицеводства РАН
Адрес: Российская Федерация
Вертипрахов В. Г.
Аффилиация: Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт птицеводства РАН
Адрес: Российская Федерация
Титов В. Ю.
Аффилиация:
Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт птицеводства РАН
Российский национальный исследовательский медицинский университет
Адрес: Российская Федерация, Москва
Название журналаРоссийская сельскохозяйственная наука
ВыпускНомер 5
Страницы57-60
Аннотация

Универсальный клеточный медиатор оксид азота, опосредующий, в частности, эффекты ацетилхолина, реализует свое физиологическое воздействие через так называемые соединения-доноры, продлевающие его физиологическое время жизни.  При помощи ферментного сенсора измерена концентрация метаболитов оксида азота в секрете поджелудочной железы кур. Показано, что в режиме голодания панкреатический секрет содержит только нитрат и не содержит других нитро- и нитрозосоединений. После приема пищи в секрете появляются соединения-доноры оксида азота в концентрации нескольких десятков микромоль и присутствуют в секрете в течение нескольких часов. Вероятно, эти соединения способствуют расслаблению гладкой мускулатуры протоков железы. Одновременно после приема пищи концентрация соединений-доноров NO увеличивается в крови в 2,5-3,0 раза и остается повышенной в течение нескольких часов. Предварительное подкожное введение атропина снимало это увеличение, не влияя на фоновый уровень доноров NO в крови. Это указывает на связь повышения их концентрации с холинэргической стимуляцией, то есть с активностью парасимпатической нервной системы. После кормления в крови увеличивается также активность трипсина. Это увеличение тоже снимается атропином.  Известно, что активность трипсина в крови имеет регуляторное влияние на функцию поджелудочной железы. Внутривенное введение препарата трипсина, вызывающее незначительное увеличение его активности в крови, способствовало повышению концентрации соединений-доноров NO в 2 раза.  По-видимому, оксид азота, представленный этими соединениями, может выступать как гуморальный фактор регуляции функции поджелудочной железы и в панкреатическом секрете, и, возможно, в крови.

 

Ключевые словаКуры, поджелудочная железа, оксид азота, нитрит, нитрат, трипсин
Источник финансированияРабота выполнена при финансовой поддержке подпрограммы «Изучение механизмов адаптации системы пищеварения млекопитающих животных и птицы к рационам с различным ингредиентным составом кормов» в соответствии с Постановлением президиума РАН №132 от 05.07.2017 и гранта Правительства РФ; Договор между Минобрнауки РФ и Московской государственной академией ветеринарной медицины имени К.И.Скрябина № 14.WO3.31.0013 от 20.02.17.
Получено21.08.2018
Дата публикации14.11.2018
Кол-во символов10370
Цитировать   Скачать pdf Для скачивания PDF необходимо авторизоваться
Размещенный ниже текст является ознакомительной версией и может не соответствовать печатной.
1 Регуляция деятельности поджелудочной железы имеет нервную и гуморальную компоненты. Известно, что парасимпатический медиатор ацетилхолин осуществляет физиологические воздействия через универсальный клеточный медиатор оксид азота (NO) посредством активации NO-синтазы [1]. Оксид азота – короткоживущая субстанция, синтезирующаяся из аргинина под действием фермента NO–синтазы. NO быстро окисляется до нитрита и нитрата. В живых тканях также образуются нитрозотиолы (RSNO), динитрозильные комплексы железа (ДНКЖ) и высокомолекулярные нитросоединения, способные трансформироваться до ДНКЖ (RNO2). Есть предположение, что все эти соединения предохраняют NO от окисления до токсического нитрита, продлевают его физиологическое время жизни и непосредственно взаимодействуют с мишенями NO [2]. Оперативное определение всего спектра метаболитов оксида азота в биообъектах представляет техническую трудность в связи с их многообразием, относительно низкой избирательностью современных методик [3, 4]. Но без этого невозможно количественно оценить эффекты эндогенно синтезируемого NO, а, следовательно, выдвинуть какие-то гипотезы о его конкретной физиологической роли и механизме действия. Выводы о медиаторной роли оксида азота в регуляции функции pancreas сделаны на основе экспериментов с блокаторами NO-синтазы [5-7]. Однако при этом не возможно ответить на вопрос сколько синтезируется эндогенного NO и на какой конкретно стадии он оказывает воздействие.
2 Разработанный в Российском национальном исследовательском медицинском центре им. Н.И. Пирогова совместно с Институтом химической физики РАН ферментативный сенсор дает возможность быстрого определения полного содержания нитро- и нитрозосоединений, а также основных физиологически значимых групп метаболитов NO в различных средах [4, 8].
3 Цель настоящей работы – определение динамики содержания эндогенно синтезируемого NO и ее корреляции с активностью панкреатических ферментов в секрете поджелудочной железы и в крови до и после приема корма.
4 Методика. Опыты проводили на курах породы Хайсекс белый 9-10-месячного возраста. Птицу содержали в виварии Всероссийского научно-исследовательского и технологического института птицеводства РАН, кормление – в соответствии с зоотехническими нормами [9]. Кровь брали в состоянии натощак после 16-часового голодания из подкрыльцовой вены в количестве 2-3 мл. В качестве антикоагулянта использовали 3,8%-ный раствор цитрата натрия. Отбор секрета pancreas осуществлялся по методике, описанной ранее [10].
5 Активность ферментов в панкреатическом соке в связи с их высокой активностью определяли классическими методами: амилазы – по гидролизу крахмала, трипсина – по гидролизу казеина [11]. Активность выражали в мг расщепленного субстрата на 1 мл сока за 1 мин. Активность трипсина в плазме крови изучали с использованием в качестве субстрата нитроанилид бензоил DL-аргинина (BAPNA) на полуавтоматическом биохимическом анализаторе BS3000P (КНР) кинетическим методом [12]. Активность амилазы и липазы в плазме крови определяли на биохимическом автоматическом анализаторе Chem well 2900 (T) (США) с использованием соответствующих наборов реагентов Human (Германия) и выражали в U/L – количество гидролизованного субстрата (мкмоль) в 1 л за 1 мин.

всего просмотров: 1623

Оценка читателей: голосов 0 

1. Moncada S., Palmer R., Higgs E. Nitric Oxide: Physiology, Pathophysiology, and Pharmacology // Pharm. Rev.– 1991.– V.43.– N 2, P.109-142.
2. Vanin A. Dinitrosyl iron complexes with thiolate ligands: Physico-chemistry, biochemistry and physiology  // Nitric Oxide 21.– 2009.– P. 1–13.
3. Tarpey M., Wink D., Grisham M. Methods for detection  of reactive metabolites of oxygen and nitrogen: in vitro and in vivo considerations. // Am. J. Physiol. Regul. Integr Comp. Physiol.– 2004.– 286.– R 431-444.
4. Titov V.Y., Kosenko O.V., Starkova E.S., Kondratov G.V., Borkhunova E.N., Petrov V.A., Osipov A.N. Enzymatic Sensor Detects Some Forms of Nitric Oxide Donors Undetectable by Other Methods in Living Tissues. //Bull Exp Biol Med.– 2016.– 162(1).– P. 107-110.
5. Jyotheeswaran S, Li P., Chang T., Chey W.Endogenous nitric oxide mediates pancreatic exocrine secretion stimulated by secretin and cholecystokinin in rats.//Pancreas.– 2000.–V. 20.– N4.– P.401-407.
6. DiMagno M., Hao Y., Tsunoda Y., Williams J., Owyang C. Secretagogue-stimulated pancreatic secretion is differentially regulated by constitutive NOS isoforms in mice.// Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol.– 2004.– Mar, 286(3).– P. 428-436.
7. Onaga T, Nagashima C, Sakata T. Effect of nitric oxide synthase inhibitors on the temporal coordination of duodenal contractions and pancreatic exocrine secretion in sheep.// JCompPhysiolB.– 2000.– V.170.– N 5-6.– P. 469-479.
8. Titov V.Yu. The Enzymatic Technologies Open New Possibilities for Studying NitricOxide (NO) Metabolism in Living Systems// Current Enzyme Inhibition. – 2011. - V.7. - N 1. - P. 56-70.
9. Руководство по оптимизации рецептов комбикормов для сельскохозяйственной птицы / Фисинин В.И., Егоров И.А., Ленкова Т.Н. и др.– Сергиев Посад.– 2014.– С.3-4.
10. Vertiprakhov V., Egorov I. The Influence of Feed Intake and Conditioned Reflex on Exocrine Pancreatic Function in Broiler Chicks.// OpenJournalofAnimalSciences.– 2016.– V.6.– P. 298-303.
11. Вертипрахов В.Г. Особенности секреторной функции поджелудочной железы цыплят-бройлеров и возможности коррекции пищеварения животных ферментными препаратами на цеолитовой основе: дисс. д-ра биол. наук. - Новосибирск, 2004. - С.59-60.
12. Mikhailova A.G., Khairullin R.F., Rumsh L.D., Demidyuk I.V., Kostrov S.V., Grinberg N.V., Burova T.V. and Grinberg, V.Y. Cloning, sequencing, expression, and characterization of thermostability of oligopeptidase B from Serratia proteamaculans, a novel psychrophilic protease. // Protein Expression and Purification.– 2014.– V. 93.– P. 63–76. doi: 10.1016/j.pep.2013.10.011.
13. Laporte J., Tremolieres J. Regulation hormonale de la sécrétion enzymatique du pancréas exocrine. // Comptesrendusde l'Académie des Sciences, ser. D.– 1971.– V. 273.– P. 1205-1207.

Система Orphus

Загрузка...
Вверх